IEF Optimizer 等电聚焦条件决定仪

IEF Optimizer 等电聚焦条件决定仪

品牌： Visual Protein

货号： IOR01

您是否对于二维电泳的再现性低弱而感到困扰呢?

二维电泳救星 "IEF Optimizer"

直接提供二维电泳样本最适化实验参数！

在进行 IEF 等电点电泳之前，每次进行样品前处理时所得到盐含量不同，就算是相同的样品分别经由相同处理步骤所得到盐含量高低也有所差异，换言之，即使找到样品最适合的 IEF条件，也不一定能够适合于不同批处理但来源物种相同的样品。

现 在，IEF Optimier 可以解决此困扰。IEF Optimizer 结合了盐度检测仪IEF Salt Meter 与在线分析软件 Voltage-Hour Calculator，可针对每一次进行实验的样品进行盐含量测量，并透过Voltage-Hour Calculator计算出电泳条件。所以就算是相同样品而有不同盐含量也可以提供最适合 IEF 条件，有助于增加实验再现性。

一、产品特点：

1. 预测IEF等电聚焦电泳条件，增加实验成功率

2. 增加二维胶体电泳实验再现性

3. 适用于市面上各种 IEF 等电点电泳系统

二、实验步骤 (简要说明)：

1. 将250-400 μl 准备好的二维胶体电泳样品加入IEF Salt Meter 的测量孔，待仪器读值慢慢上升到读值稳定之后，记录盐含量读值与温度读值，並将回收的样品保存于冰上【此样品可取适当量后直接进行二维电泳】。

2. 使用网络浏览器链接至 Visual Protein ***的 Voltage-Hour Calculator 页面，将各项实验参数与IEF Salt Meter测得的盐度与温度读值填入字段，系统将运算出优化的IEF 等电点电泳条件 (total voltage hour)。如果样品状况不佳，系统则会直接告知”DO NOT PERFORM IEF”。

三、实验结果图：

图1：

以猪肝为样品，进行二维胶体电泳，***维电泳范围从 pH3 到 pH10，而第二维电泳以 12.5 % SDS-PAGE 进行分离。左图之***维电泳条件依据 IEF 等电点仪器原厂操作手册提供条件进行；右图之***维条件，则依据 IEF Salt Meter 建议的电泳条件所进行。以肉眼即可判断出右图影像所显示的蛋白质点较多且分离效果较佳。

四、Q&A

Q1：IEF Optimizer 如何校正?

A1：使用前先以装有 ddH2O 的洗涤瓶冲洗盐含量测量孔及侦测器，并

取拭镜纸将其擦干，再取出与样品同体积的 Rehydration Buffer 注入测量孔中，待仪器读值慢慢上升到稳定后，记录仪器盐含量读值 (SB) 与温度读值 (TB) 作为检测背景值。

Q2：IEF Optimizer 可连续测量不同样品吗?

A2: 可以，但每次测量前需先以ddH2O清洗。